АНТИРЕТРОВИРУСНАЯ АКТИВНОСТЬ МЕЛАНИНОВ ИЗ ПРИРОДНОЙ И КУЛЬТИВИРУЕМОЙ ЧАГИ (INONOTUS OBLIQUUS)

Внизу статьи ссылка на  PDF файл с текстом статьи, удобней читать его.

АНТИРЕТРОВИРУСНАЯ АКТИВНОСТЬ

МЕЛАНИНОВ ИЗ ПРИРОДНОЙ И

КУЛЬТИВИРУЕМОЙ ЧАГИ (INONOTUS OBLIQUUS)

Гашникова Н.М.1, Балахнин С.М.1, Теплякова Т.В.1,

Ананько Г.Г.1, Косогова Т.А.1, Сухих А.С.2

1 Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии

«Вектор», Кольцово

2 Кемеровская медицинская академия

Крайне актуальной является проблема разработки эффективных

и недорогих антиретровирусных средств, не обладающих токсиче-

ским действием на организм человека и препятствующих развитию

резистентности вируса иммунодефицита человека.

Ранее было показано, что экстракт из скошенного трутовика

Inonotus obliquus (чага), а также меланин, выделенный из природ-

ного сырья чаги, проявляют противовирусный эффект в отношении

вируса иммунодефицита человека [1], вируса осповакцины и вируса

гриппа (A/chicken/Kurgan/05/2005 (H5N1), A/Aichi/2/68 (H3N2) [2].

Задачей данной работы было сравнительное исследование

антиретровирусной активности меланинов, полученных из при-

родного склероция чаги и из глубинной культуры Inonotus obliquus,

штамма Т-9, выращенной на глюкозопептонной среде в течение

10 суток. Выделение меланина из природной и культивируемой

чаги проводили методом щелочного гидролиза [3]. Поглощение УФ

и видимого света водными растворами меланинов регистрирова-

ли на спектрофотометре (PD-303UV, APEL), использовали также

ИК-спектрометрию, которую проводили с помощью однолучевого

интерференционного (с обратным преобразованием Фурье) ИК-

спектрометра ФСМ-1202 («Инфраспек», Россия).

Исследование противовирусной активности образцов ме-

ланинов в отношении ВИЧ-1, (штамм ГКВ 4046) проводили на

перевиваемой линии лимфоцитов человека МТ-4. Определяли

концентрацию вещества, не оказывающую токсического действия

на клетки МТ-4 (ТС50, концентрация, при которой клетки сохраняли

50 % жизнеспособность), а также 50 % ингибирующие концентра-

ции исследуемых препаратов (IС50), вызывающие 50 % подавление

прироста вирусоспецифического белка р24 при внесении в культуру

клеток вируса и препарата.

Метод ИК-спектроскопия позволил установить, что меланин

из культуры на основе штамма Т-9 имел большее число широких,

300 Успехи медицинской микологии. 2014

плохо разрешенных (добавочных) полос поглощения. Можно пред-

положить, что в образце присутствуют несколько типов, близких по

строению молекул. Наличие смещения 2919 и 2924, 2849 и 2852 см-1

для полос, соответствующих метильным (метиленовым) группам,

можно объяснить отличием в ориентации полимерной структуры

меланинов из природной чаги и из выращенной в культуре. Важным

отличием также является относительно большее содержание аро-

матических структур и их иные порядки локализации в структуре

молекулы у образца меланина из культуры. Различия в диапазоне от

1200 до 1000 см-1, который в химии гуминовых и гуминоподобных

веществ характерен для полисахаридных структур, связан с иным

качественным и количественным содержанием углеводных фраг-

ментов. Эти данные согласуются с мнением ученых, исследовавших

комплекс меланиновых пигментов из чаги и сделавших вывод, что

меланины из природной и культивированной чаги имеют разное

химическое строение, что позволяет относить их к разным видам:

меланин из природной чаги к алломеланинам, а полученный из

культуры гриба – к эумеланинам, которые могут различаться по

биологической активности [4].

Наши результаты показали, что ингибирующий эффект в от-

ношении ВИЧ-1 водного раствора меланина, полученного из при-

родного гриба (склероция) I. obliquus, (IC50) составил 2,0 мкг/мл, а

противовирусная эффективность меланина из культивируемой чаги

– 38,0 мкг/мл. Меланин из природной чаги в 14 раз превосходит по

активности меланин, полученный в процессе культивирования. В

то же время меланины, полученные из биомассы и культуральной

жидкости чаги I. obliquus Т-9 были менее токсичными по отношению

к клеткам МТ-4: для меланина из природной чаги ТС50=200 мкг/мл,

для меланина из культуры ТС50 более 500 мкг/мл. Таким образом,

различия в химической структуре двух образцов меланина сказы-

ваются на их биологической, в данном случае, антиретровирусной

активности. По индексу селективности (IS=ТС50/IС50) меланин из

чаги, полученной в культуре (IS=13), уступает меланину из при-

родного склероция (IS=100). Однако проведенные исследования

открывают возможности для создания антиретровирусных пре-

паратов на основе меланина. Для биотехнологии препаратов важен

поиск новых штаммов-продуцентов меланина и оптимизация ме-

тодов их глубинного культивирования с целью повышения выхода

меланина и увеличения их антивирусной активности. Одним из

важнейших вопросов для использования природных соединений

является стандартизация препаратов.

Том XII. Глава 5. Лекарства из грибов 301

Список литературы

1. Tepljakova TV, Gashnikova NM, Puchkova LI, Pronjaeva TR,

Kosogova TA, inventors; Federal’noe gosudarstvennoe uchrezhdenie

nauki «Gosudarstvennyj nauchnyj tsentr virusologii i biotekhnologii

«Vektor» Federal’noj sluzhby po nadzoru v sfere zashchity prav

potrebitelej i blagopoluchija cheloveka (FGUN GNTs VB «Vektor»

Rospotrebnadzora), assignee. [Inhibitor of reproduction of human

immunodeficiency virus type 1]. Russia patent RU 2375073. 2009

Dec 10. Int. Cl. A61K38/06; A61P31/18. Russian.

2. Tepljakova TV, Puchkova LI, Kosogova TA, Bulychev LE, Shishkina LN,

Mazurkova NA, Gashnikova NM, Balakhnin SM, Kabanov AS,

Kazachinskaja EI, Afonina VS, inventors; Federal’noe bjudzhetnoe

uchrezhdenie nauki «Gosudarstvennyj nauchnyj tsentr virusologii

i biotekhnologii «Vektor» (FBUN GNTs VB «Vektor»), assignee.

[Melanine antiviral agent]. Russia patent RU 2480227. 2013 Apr 27.

Int. Cl. A61K 36/06; A61K 31/785; A61P 31/22; A61P 31/12; A61P

31/16; A61P 31/18. Russian.

3. Kosogova TA. [Strains Basidiomycetes south of Western Siberia –

advanced organic producers active drugs] [master’s thesis]. [Russia]:

State Research Center of Virology and Biotechnology “Vector”; 2013.

172 p.

4. Babickaya VG, Szczerba VV, Ikonnikova NV. [Melanin complex

mushroom Inonotus obliquus]. Appl Biochem Microbiol. 2000;

36(4): 439-44.

Сопутствующие Товары

Похожие статьи

 Грибы против Вируса Иммунодефицита Человека и других болезней
Как обрести здоровье? ВВЕДЕНИЕ. Единственным на сегодняшний день средством, препятствующим развитию ВИЧ-инфекции и прогрессированию данного заболевания, является антиретровирусная комбинир..
205
Рекомендации по употреблению гриба Рейши-Линчжи.
Рекомендации по употреблению гриба Рейши-Линчжи.3 СПОСОБА:1. Настойка на Родниковой , тёплой воде.Настойку готовят в термосе. Высушенный гриб (50 грамм) заливают полутора литрами очищенной или дистилл..
108

Написать отзыв

Внимание: HTML не поддерживается! Используйте обычный текст.
    Плохо           Хорошо